<<
>>

ГЛАВА 11. СЕМЕЙСТВО ОРТОМИКСОВИРУСОЭ( ORTHOMYXOVIRIDAE )

Название происходит от греч. orthos — правильный и щуха слизь и было предложено для этого семейства в связи с сродством его представителей к муцину. К миксовирусам были отнесены вирусы гриппа, кори, паротита, парагриппа, респираторно-синцитиальный вирус, которые позже были выделены в отдельное семейство парамиксовирусов.

КЛАССИФИКАЦИЯ ВИРУСОВ ГРИППА

Все представители семейства ортомиксовирусов являются вирусами гриппа.

Они классифицируются на вирусы гриппа типов А, В и С по антигену РНП, который не дает перекрестных межтиповых серологических реакций*. Характерной особенностью вирусов гриппа типа А является изменение антигенных свойств обоих поверхностных белков (гликопротеидов) гемагглютинина и нейраминидазы. Многочисленные антигенные варианты вирусов гриппа с различными типами гемагглютинина и нейраминидазы выделяют от домашних и диких животных. Наличие различных антигенных вариантов потребовало унифицированной классификации вирусов на основе антигенных свойств гемагглютинина и нейраминидазы.

С 1980 г. по предложению ВОЗ введена новая классификация вирусов гроша типа А, основанная на обозначении антигенного подтипа гемагглютинина и нейраминидазы. Гемагтлютинирующие антигены всех штаммов вируса гриппа сгруппированы в 13 подтипов HI — Н13, а ней- раминидазные антигены — в 10 подтипов N1—N10.

1 Поскольку вирус гриппа типа С отличается от вирусов гриппа типов А и В по ряду фундаментальных свойств, он выделен в отдельный род.

У вируса гриппа типа В, хотя и существуют антигенные варианты, однако их не так много и они не нуждаются в классификации. В отличие от вирусов типа А, циркулирующих как у людей, так и у животных, вирусы гриппа типа В выделены только от человека.

По рекомендации ВОЗ система номенклатуры вирусов гриппа состоит из 2 частей: обозначение штаммов и описание антигенов гемагглютинина и нейраминидазы.

Обозначение штаммов включает: 1) тип (А, В и С); 2) естественный хозяин, если это не человек; 3) геогра-фическое происхождение штамма; 4) порядковый номер штамма; 5) год выделения штамма. Описание антигенов НА и NA для вируса типа А следует за обозначением штамма и заключается в круглые скобки, например А/утка/СССР/695/76 (H3N2).

Типовым представителем ортомиксовирусов является вирус гриппа типа А.

ВИРУСЫ ГРИППА ТИПА А

Вирус гриппа человека выделен в 1933 г. Смитом, Эндрюсом и Лейдлоу путем заражения хорьков смывами носоглотки больного гриппом Вильсона Смита (отсюда название первого штамма WS).

Морфология. Вирус имеет сферическую форму, диаметр вирусной частицы 80—120 нм (см. рис. 7, а). В препаратах свежевыделенных от больного вирусов встречаются нитевидные формы значительной длины. Вирус содержит липопротеидную оболочку, покрытую шипиками длиной около 10 нм. Шипики образованы двумя гликопротеидами — гемагглютинином и нейраминидазой. Шип гемагглютинина образован тремя молекулами белка, шип нейраминидазы образован четырьмя молекулами белка (рис. 43).

Внутренним компонентом вирионов является нуклео- капсид спиральной симметрии с диаметром около 9 нм. Он уложен в виде двойной спирали с диаметром 50—60 нм с односпиральной петлей на конце.

В соответствии с 8 фрагментами генома имеется 8 фрагментов нуклеокапсида. В составе вирионов между фрагментами существует слабая связь.

Химический состав и физико-химические свойства. Вирус содержит по массе 1—2% РНК, 50—70% белков, 18—37% липидов, 5—9% углеводов. Липиды содержатся в липопротеидной оболочке, углеводы — в составе глико-

Рис. 43. Строение вириона гриппа (схема).

а — мономер гемагглютинииа: 1—малая субъединица гемагглютинина; 2— большая субъединица гемагглютинина; 3— место нарезания гемагглютинина* предшественника; 4— С-конец малой гемагглютинирующей субъединицы, погруженный в липиды; 5— N-конец большой гемагглютинирующей субъединицы, взаимодействующий с рецепторами клетки; б— антигенная детерминанта;

— тример гемагглютинина; в — мономер нейраминидазы; 7— гидрофильный участок нейраминидазы; 8 — стержень нейраминидазы; 9 — гидрофобный участок нейраминидазы; г — тетрамер нейраминидазы; 10 — нейраминидаза в составе вириона; 11—гемагглютинин в составе вириона; 12 — липидный бислой наружной оболочки вириона; 13 — слой матриксного белка; 14 —- рибонуклеопротеид.

протеидов.

И липиды и углеводы имеют клеточное происхождение.

Молекулярная масса вирусной частицы 250- 10®, плавучая плотность в сахарозе 1,19 г/см3. Фрагменты нуклеокапсида имеют длину от 50 до 130 нм; плавучая плотность нуклеокапсида в хлориде цезия 1,34—1,35 г/см3.

Геном. Геном представлен 8 фрагментами однонит-чатой линейной «минус-нитевой» РНК. Молекулярная масса отдельных фрагментов от 0,2- 10® до 1- 10®, общая молекулярная масса 5* 10®. Каждый фрагмент, за исключением 7-го и 8-го, кодирует один белок, фрагменты 7 и 8 кодируют по два белка с уникальными последовательностями аминокислот, благодаря сплайсингу и сдвигу рамки при трансляции.

Определена первичная структура всех генов вируса гриппа.

Белки, антигены. В составе вируса гриппа содержится

белков.

Белки Pi, Рг, Рз названы по первой букве слова «по-лимераза», поскольку предполагалось, что все три являют-

ся субъединицами РНК-полимеразы. На самом деле, РНК- полимеразой является белок Pi. Белок Рз обладает свойствами эндонуклеазы, «откусывая» «шапочку» у клеточных иРНК вместе с 10—13 прилегающими нуклеотидами и перебрасывая ее на 5'-конец вирусного транскрипта. Функции белка Рг неизвестны. Белки Pi и Рз обладают основными свойствами, а белок Рг — кислыми, поэтому их еще называют PBi (Pi), РВг (Рз) и РА (Рг). Все три белка находятся в составе нуклеокапсида и образуют комплекс, интимно связанный с геномом.

Мономер гемагглютинина имеет форму палочки длиной 14 нм и диаметром 4 нм, которая одним концом (С-конец легкой цепи) погружена в липидный бислой (рис. 44). Субъединица гемагглютинина представляет собой тример.

Гемагглютинин синтезируется в виде предшественника, который нарезается протеолитическими ферментами на две субъединицы, тяжелую цепь (НА1) и легкую (НА2) с молекулярными массами примерно 50 ООО и 25 ООО, связанные дисульфидными связями.

С помощью рентгеноструктурного анализа кристаллизованного НА, сделанного Д. Скейлом с соавт., предложена его пространственная модель.

Согласно этой модели в тримере НА обнаруживаются два структурных участка — стебель и глобула. Глобула содержит антигенный и рецепторный участки (см. рис. 44). Она состоит только из НА1, а стебель — из обеих субъединиц (НА1 и НА2).

Обнаружено четыре предполагаемые зоны антигенов А, В, С, D. Зона антигена А является петлей, которая образуется между тримерами. Эти зоны соответствуют четырем антигенным детерминантам. Все они связаны с тяжелой цепью гемагглютинина. Две из них являются последовательными, а две образуются при взаимодействии мономеров. Третья обусловлена третичной структурой, четвертая — четвертичной структурой и формируется путем взаимодействия трех мономеров (см. рис. 44). Наиболее активными антигенными детерминантами яв-ляются 1-я и 2-я.

Гемагглютинин является основным специфическим антигеном вируса, определяющим, наряду с нейрамини- дазой, подтип вируса и вызывающий образование протективных антител. Свойство гемагглютинина к антигенной изменчивости обусловлено двумя генетическими процессами — дрейфом и шифтом. В результате дрейфа происходят незначительные изменения гена НА, обусловленные точечными мутациями, а антигенные свойства Рис. 44. Гемагглютинин вируса гриппа.

а — тример с четырьмя антигенными детерминантами (черные квадратики) и участком взаимодействия с клеточным рецептором (белый квадратик — рецепторный карман); б — структура мономера по данным рентгеноструктурного анализа. Цифры обозначают порядковый номер аминокислот, кружки, квадраты и треугольники—4 антигенные детерминанты (А, В, С и D), 1 — место нарезания Предшественника (N-конец малой субъединицы), S-S-дисуль- фидные связи.

меняются незначительно, но при продолжительном периоде циркуляции вируса под влиянием коллективного иммунитета селекционируются варианты, значительно отличающиеся по антигенным свойствам от прототипного штамма. Шифт возникает в результате полной смены гена и обусловлен их пересортировкой при одновременной репродукции в клетке двух вирусов гриппа.

Вирус агглютинирует эритроциты кур, морских свинок, человека и многих других видов животных.

При низких значениях pH (5,0—5,5) вирус вызывает гемолиз эритро-цитов.

Нейраминидаза является ферментом, катализирующим отщепление сиаловой кислоты от субстрата. Мономер нейраминидазы под электронным микроскопом имеет вид барабанной палочки и состоит из головки, обращенной кнаружи, размером 4X4X4нм и ножки длиной 10 нм. Соединение двух мономеров происходит за счет дисуль- фидных связей, а двух димеров в тетрамере — за счет межмолекулярных связей. Активные центры и антигенные детерминанты находятся на головках мономеров.

Нейраминидаза может изменяться независимо от гемагглютинина, в основе антигенной изменчивости также лежат процессы дрейфа и шифта. Антитела против нейраминидазы не оказывают такого защитного действия, как антитела против гемагглютинина, однако, они частично нейтрализуют вирус и ослабляют инфекционный процесс.

Нуклеопротеид (NP) — основной внутренний белок вируса, формирующий субъединицы капсида. Он интимно связан с геномом в течение всего периода репродукции вируса, но не препятствует экспрессии генома. Этот белок является типоспецифическим антигеном, общим для всех вирусов типа А. Антитела к NP не оказывают защитного действия и применяются с целью диагностики инфекции.

Матриксный белок — самый низкомолекулярный белок в составе вириона, локализованный на внутренней поверхности липопротеидной мембраны вируса. Mi-белок играет роль медиатора при сборке вирусной частицы. Mi-белок является стабилизирующим фактором, при его отсутствии или уменьшении концентрации вирусная частица становится хрупкой и быстро распадается.

Матриксный белок, как и NP, является типоспецифическим антигеном, общим для всех вирусов типа А. Белок Мг, который кодируется тем же седьмым геном, является неструктурным и локализован в клеточной оболочке.

Белки NSi и NS2— неструктурные вирусные белки, которые хотя и кодируются одним (восьмым) геном, имеют уникальные последовательности аминокислот благодаря трансляции со сдвигом рамки. Белок NSi синтезируется на самых ранних этапах репродукции.

В ядре и цитоплазме он накапливается в больших количествах и образует включения.

Чувствительность к физическим и химическим факторам. Вирус гриппа относительно стабилен и может сохра-няться при температуре 4° С в течение недели. Инфекционная активность сохраняется продолжительное время при хранении при температуре —70° С. Прогревание при температуре 50—60° С уничтожает его активность в течение нескольких минут. Вирусы чувствительны к эфиру, детергентам. При низких значениях pH (3,0 и ниже) инфекционная активность теряется.

Репродукция. Вирус адсорбируется на клеточных рецепторах, содержащих сиаловую кислоту (гликопротеидах или ганглиозидах). Проникновение вируса в клетку Осуществляется обычно по механизму рецепторного эндоцитоза с последующим слиянием вирусной мембраны со стенкой вакуоли и выходом нуклеокапсида в цитоплазму, а затем в ядро. Слияние происходит при низких значениях pH, которые создаются в эндоцитарной вакуоли — рецептосоме. Транскрипция и репликация генома происходят в ядре в составе нуклеокапсида.

Затравкой для транскрипции является КЭП, «шапочка», которая вместе с 10—13 нуклеотидами отрезается от клеточных иРНК, находящихся в ядре (отсюда необходимость ядерной локализации транскрипции), и перебрасывается на 5'-конец вирусного транскрипта.

На ранней стадии с наибольшей скоростью синтезируются иРНК для белков NS и NP, на поздней стадии — иРНК для белков НА, NA, М. Соответственно белки NS и NP являются ранними, а НА, NA и М — поздними. Белки Р синтезируются на протяжении инфекционного цикла с одинаковой скоростью.

Нуклеокапсиды транспортируются из ядра в цитоплазму и затем к клеточной оболочке к тем ее модифицированным участкам, на которых снаружи находятся вирусные гликопротеиды, а со стороны цитоплазмы — Mi-белок. Вирус выходит из клетки путем почкования.

Патогенез и клиника. Вирус гриппа попадает в организм через дыхательные пути вместе с каплями влаги и частицами пыли. Чем меньше величина капель и частиц, тем глубже проникает вирус в дыхательные пути. Благодаря короткому инфекционному циклу вируса (6—8 ч) при попадании в верхние дыхательные пути одной вирусной частицы уже через 8 ч количество инфекционного потомства достигает 103, а к концу первых суток — 1027. Эти расчеты объясняют столь короткий инкубационный период при гриппе — 1—2 сут. Репродукция вируса происходит в клетках эпителия слизистой оболочки дыхательных путей.

Может развиться первичная пневмония с некрозом эпителия бронхиол. Пораженные клетки отторгаются, а продукты их распада всасываются, попадают в кровь, вызывая интоксикацию организма и лихорадочное состояние. Вирус проникает в кровь и разносится по всему организму. Активация вирусом всей системы протеолиза и повреждение клеток эндотелия капилляров приводит к повышенной проницаемости сосудов, кровоизлияниям и дополнительному повреждению ткани. Возникают патологические изменения в почках, мозге. В результате повышенной проницаемости сосудов может возникнуть отек мозга с летальным исходом. Это случай так называемого молниеносного гриппа, когда смерть наступает на 2—3 сут. Вирус гриппа, попадая в кровь, вызывает угнетение кроветворения и иммунной системы, развивается лейкопения, может присоединиться интеркурентное заболевание, наблюдаются осложнения, вызванные бактериями и другими вирусами — затяжные риниты, гнойные синуситы, отиты, вторичные вирусные бронхиты и. пневмонии.

Однако описанное беспрепятственное распространение вируса в организме имеет место далеко не во всех случаях и может быть приостановлено при включении в процесс факторов неспецифического и специфического иммунитета, таких как неспецифические ингибиторы, находящиеся в крови, имеющиеся у больных антитела, интерферон. В результате развитие вирусной инфекции замедляется или прерывается, а через несколько суток появляются специфические антитела класса IgM, которые «защищают» организм. Антитела класса IgG появляются лишь спустя 2 нед после начала заболевания и их роль состоит в защите против повторного заражения данным серовариацтом вируса гриппа.

Для клинического течения гриппа характерно быстрое развитие инфекции с высокой температурой, общей интоксикацией, воспалительными процессами в дыхательных путях. Температура достигает 38—39° С и более. Общая интоксикация выражается в головной боли, боли в глазных яблоках, резком угнетении. Развиваются симптомы местного поражения дыхательных путей — насморк, кашель, боли за грудиной. Поражение эндотелия стенок кровеносных сосудов приводит к точечным кровоизлияниям в верхних дыхательных путях, трахее, бронхах. Если развивается первичная гриппозная пневмония, она имеет геморрагический характер, и мокрота содержит прожилки крови.

Иммунитет. Пассивный иммунитет, передаваемый от матери, сохраняется у детей на протяжении первый месяцев жизни. После перенесенного заболевания возникает стойкий иммунитет.

Повторные заболевания гриппом обусловлены не • кратковременностью иммунитета, а появлением новых серовариантов вируса гриппа, против которых у населения нет иммунитета.

В иммунитете против гриппа большую роль играют антитела класса IgA, накапливающиеся в секрете слизис-той оболочки полости носа.

Эпидемиология. Эпидемиология гриппа своеобразна и не имеет аналогов среди других инфекционных заболеваний. Грипп передается воздушно-капельным путем. Больной или носитель (часть зараженных переболевает гриппом в инаппарантной или стертой форме) выделяют вирус вместе со слизью носоглотки и верхних дыхательных путей не только при кашле и чиханье, но и при разговоре. Так как инкубационный период болезни очень короток и не превышает 1—2 дней, то возникшая эпидемия распространяется довольно быстро, охватывая все новые и новые восприимчивые контингенты населения. Дальнейшее развитие эпидемии регулируется иммунитетом, который развивается после болезни через 1—1 '/г нед, и поэтому по мере нарастания иммунной прослойки эпидемия гриппа идет на убыль. В условиях даже большого города на это уходит около месяца, а при нынешних широких связях между странами и быстрых транспортных средствах эпидемии гриппа в течение немногих месяцев охватывают население многих стран, нередко — все полушарие или даже всю планету. Такие обширные эпидемии называются пандемиями.

Причиной повторных эпидемий гриппа и повторных заболеваний является уникальная изменчивость белков вирусов гриппа (гемагглютинина и нейраминидазы) в результате шифта и дрейфа. Люди, болевшие ранее гриппом, полностью восприимчивы к новому сероварианту вируса, к которому нет коллективного иммунитета, он начинает безудержно распространяться среди населения всего земного шара, вызывая пандемию гриппа.

Первая достоверно документированная пандемия гриппа (ретроспективно мы знаем, что это был грипп типа А) возникла в 1889 г. Предполагается, что она началась в Китае, а затем в течение ближайших 1 ‘/г— 2 лет распространилась на все страны мира.

Следующая пандемия гриппа возникла через 29 лет — в 1918 г. За два года она распространилась во все страны мира и от нее попнбло около 20 млн. человек. Никогда до этого и после этого грипп не протекал так тяжело.

На основании иммунологических исследований было установлено, что пандемия была вызвана вирусом, циркуляция которого к началу 30-х годов прекратилась среди .людей и вирус был выделен от свиней. Эта пандемия началась в Китае, но он получил название «испанского» гриппа, так как первые упоминания о тяжелой эпидемии появились в Испании. Вирус, вызвавший эту эпидемию, в настоящее время обозначается H1N1. После 1918 г. эпидемии гриппа типа А повторялись через 2—3 года, а гриппа типа В — через 4—6 лет. В 1947—1949 годах возникла пандемия гриппа типа А, которая медленно распространялась и в течение 3 лет прошла во всех странах мира. Следующая пандемия получила название азиатской, а вызвавший ее вирус назвали вирусом азиатского гриппа. Эта пандемия, как и две предшествовавшие, началась в Китае (первый вирус, однако, был выделен в Сингапуре) в 1957 г. и к концу года охватила весь мир, вызвав заболевание от 1,5 до 2 млрд. человек. Панде-мия была вызвана новым серовариантом вируса гриппа с антигенной формулой H2N2 (вирус азиатского гриппа). Одновременно перестал циркулировать вирус H1N1.

В дальнейшем эпидемии гриппа стали наблюдаться почти ежегодно, отличаясь степенью интенсивности — в зимние месяцы в северном полушарии, в летние месяцы — в южном полушарии. Новая пандемия разразилась через 11 лет, в 1968 г. она также началась в Китае и была вызвана вирусом, получившим название «гонконгского» по месту его выделения. Пандемия развивалась стремительно и поразила не менее 1 млрд. человек. Пандемию вызвал новый серовариант — гонконгский вирус гриппа с антигенной формулой H3N2, и одновременно перестал циркулировать среди людей азиатский вирус гриппа H2N2.

В 1977 г. произошло необычайное событие — «возвратился» вирус H1N1 после 20-летнего отсутствия. И на этот раз эпидемия началась в Китае. Заболевали почти исключительно лица моложе 20 лет, т. е. родившиеся после 1957 г., когда прекратилась циркуляция этого вируса среди населения. Другой особенностью явилось то, что предшествующий вирус (H3N2) не исчез, а также продолжал циркулировать и были выделены штаммы- рекомбинанты, содержавшие гены обоих вирусов. Вирус, вызвавший пандемию, получил название А/СССР/77, так как он впервые был выделен советскими учеными и немедленно передан ВОЗ. Позже выяснилось, что сходные

H2N ?H3N8 H3N2 Hsw1 HONI HINt H2N2 H3N2 /

(874 1889 1901 1918 1957 1968 1977 1981

Рис. 45. История пандемий гриппа.

вирусы были выделены летом 1977 г. в Китае. История пандемий показана на рис. 45.

Начав циркулировать среди населения, новый вариант вируса не остается стабильным: его гликопротеиды НА и NA из года в год претерпевают антигенный дрейф, который приводит к тому, что через 2—3 года, а иногда и ранее выработанный иммунитет обеспечивает лишь частичную защиту от заболевания. Коллективный иммунитет (иммунологический пресс) является тем фактором, в результате которого селекционируются новые антигенные варианты, т. е. является движущей силой антигенного дрейфа.

По основному вопросу — источнику появления новых вариантов вируса гриппа в результате шифта — существуют две основные концепции. Согласно одной из них варианты, исчезнувшие из человеческой популяции, на самом деле продолжают циркулировать среди населения. Фактов, подтверждающих это предположение, нет. Другая гипотеза объясняет появление новых антигенных вариантов возвращением в человеческую популяцию вирусов, циркулирующих у животных. Во время эпидемии человек массивно выделяет вирус гриппа в биосферу и эпидемии и пандемии гриппа обычно сопровождаются эпизоотией среди домашних и диких животных, особенно птиц. Установлены экологические и эволюционные связи между вирусами человека и животных, и (благодаря секвени- рованию гена гемагглютинина) природа шифтов, которые привели к появлению азиатского и гонконгского серо- вариантов вирусов. Азиатский вирус сохранил четыре гена своего предшественника H1N1 — гены Pi, Рг, Рз и NP, и получил новые четыре гена от предполагаемого партнера — гены НА, NA, М и NS. У гонконгского вируса H3N2 остались неизменными семь генов предшественника и только один ген НА был заменен в ходе рекомбинации. Возможными источниками этого гена были названы два вируса: вирус Hav7Neq2, выделенный от уток на Украине, и вирус Heq2Neq2, выделенный от лошадей в Майами (США).

Лабораторная диагностика. Материалом для иссле-дования является отделяемое носоглотки, которое берут в первые 3 дня болезни ватными или марлевыми тампонами с задней стенки глотки, и мазки-отпечатки слизистой оболочки носовой полости. В летальных случаях используют кусочки пораженной легочной ткани, соскоб слизистой оболочки трахеи и бронхов.

Быстрая диагностика основана на выявлении вирусного антигена в эпителии слизистой оболочки верхних дыхательных путей. Наиболее широко используют метод ИФ. Антиген выявляют в мазках-отпечатках или эпителии, полученных из отделяемого носоглотки с помощью прямого и непрямого методов, используя коммерческие флюоресцирующие иммуноглобулины. Специфический антиген обнаруживается в цитоплазме в виде ярко светящихся конгломератов. Серологический вариант вируса гриппа (типов А, В или С) можно определить с помощью ИФ. Разработаны методы быстрой диагностики с помощью непрямой иммуноферментной реакции, основанные на идентификации типоспецифических антигенов (М и NP) в смывах носоглотки больных.

Выделение вируса. В связи со сменой серо- вариантов вируса гриппа желательно выделение его при вспышках и эпидемиях. Основным методом выделения вируса гриппа из смывов носоглотки является заражение 10—11-дневных куриных эмбрионов в амнион.

Идентификацию вируса проводят в РТГА или в РСК.

В сыворотках животных содержится большое количество неспецифических ингибиторов гемагглютинации, как термолабильных, которые разрушаются при прогревании сывороток при температуре 58° С, так и термостабильных. Вирусы гриппа могут быть как чувствительными, так и устойчивыми к ингибиторам. В первом случае иммунные сыворотки для удаления ингибиторов обраба-тывают углекислотой, перийодатом калия или фильтратом .холерного вибриона. Вирусы гриппа агглютинируют эритро-циты с разной интенсивностью (авидностью) и в зависимости от этого их делят на авидные и неавидные штаммы. Для неавидных штаммов лучше использовать эритроциты человека группы 0. Для выделения вируса используют также культуры клеток эмбриона человека (почек и легких), почек обезьяны, МДСК и др. Индентификацию вируса проводят в РТГА, ИФ.

Серологическая диагностика заключается в обнаружении прироста антител в парных сыворотках больных. Используют РСК и РТГА, в качестве антигенов используют стандартные диагностикумы. Во второй сыворотке больного может быть обнаружен прирост антител сразу к двум или большему количеству используемых антигенов. В этом случае возбудителем заболеваїшя считают тот штамм, к которому во второй сыворотке выявлен наивысший титр антител. Серологическую диагностику осуществляют также с помощью PH и ИФ в культуре клеток, реакции преципитации в геле, РРГ, ИФА. В PH используют наиболее чувствительные к вирусу культуры клеток почек собаки (MDCK) или быка (MDBK), а также клетки почек человека и обезьяны.

Профілактика и лечение. Применяются как убитые, так и живые вакцины. Те и другие имеют свои преимущества и недостатки. Получение вакцинных штаммов основано на следующих принципах. Заранее приготавливается вирус-носитель, который обладает всеми необходимыми свойствами и хорошо размножается в лабораторных условиях (куриных эмбрионах). Используя тех-нику рекомби наци, от «актуального» вируса вирусу- носителю пересаживают только два гена — НА и N А, определяющих иммунологические свойства вируса. Для получения убитой вакцины вирус выращивают обычно на куриных эмбрионах, затем очищают от примесей, концентрируют и инактивируют формальдегидом или другими химическими и физическими воздействиями, например, ультрафиолетовым облучением. При правильном подборе вакцинных штаммов вакцины снижают заболеваемость среди привитых в 2'/г—3 раза по сравнению с непривитыми. В качестве вируса-носителя для живых вакцин перспективно использование «Холодовых» мутантов, которые неспособны к репродукции при температуре 37° С, но хорошо размножаются при более низких температурах, свойственных слизистой оболочке НОСОГЛОТКИ (32—34° С). При этом создаются условия для репродукции вакцинного штамма в эпителии носоглотки, а не легочных альвеол. Для детей младшего возраста, а также лиц пожилого возраста, страдающих хроническими заболеваниями, разрабатываются вакцины со сниженной реактогенностью. Такие вакцины получают путем расщепления вирионов и выделения гемагглютинина и нейра-минидазы (субъединичные вакцины). Для лечения и про-филактики гриппа применяют химиопрепараты — аман- тадин и ремантадин. Последний является менее токсичным препаратом, его назначают внутрь в дозе 150—300 мг

в сутки в течение 2—3 дней. Лечение следует начинать ' как можно раньше после начала заболевания. Для лече- ' ния и профилактики гриппа используют интраназальное введение интерферона.

ВИРУСЫ ГРИППА ТИПА В

Структура вирусных частиц сходна со структурой вируса гриппа типа А. Геном представлен 8 фрагментами. Белки (7 структурных и 2 неструктурных) имеют молекулярную массу от 21 • 106 до 106 • 106.

В лабораторных условиях вирусы гриппа типа В раз-множаются в куриных эмбрионах медленнее, чем вирусы типа А (72 ч вместо 48 ч), для них требуется пониженная температура инкубации (33—35° С). Вирусы типа В агглютинируют эритроциты кур, морских свинок, человека. Хотя официального разделения на серовариавты у вирусов гриппа типа В не проведено, однако по антигенным свойствам гемагглютинина и нейраминидазы можно выделить 5 серовариантов. Как и при гриппе типа А, имеется определенная связь между изменением антигенной структуры штаммов и активацией эпидемического процесса. Появление новых антигенных вариантов также является причи- лой вспышек, а утратившие эпидемическое значение варианты вытесняются из циркуляции. Однако эти процессы выражены менее четко, чем при гриппе типа А. Вирусы гриппа типа В не вызывают пандемии и являются причиной локальных вспышек и эпидемий, иногда охва-тывающих одну или несколько стран, и спорадических случаев. Вспышки гриппа типа В могут совпадать с таковыми гриппа типа А или предшествовать ему.

Вирусы гриппа типа В циркулируют только в человеческой популяции, клиническая картина при этом заболевании такая же, как и при гриппе типа А, и дифференциальный диагноз осуществляется лабораторными методами. Специфическая профилактика та же, что и при гриппе типа А. Ремантадин при гриппе типа В неэффективен.

ВИРУС ГРИППА ТИПА С

Вирус гриппа типа С имеет такую же морфологию и размеры как вирусы типа А, но отличается от вирусов гриппа типов А и В не только по антигенным, но и по ряду фундаментальных свойств. Г еном представлен семью фрагментами, молекулярная масса которых в сумме такая же, как и у вирусов гриппа типа А и В. В составе вириона обнаружено 6 белков, 3 из которых гликозилированы. Нейраминидаза в составе вириона не обнаружена. В отличие от вирусов типа А и В, вирус С не агглютинирует эритроциты морской свинки, а при адсорбции на эритроцитах кур связывается с другим рецептором, который не взаимодействует с вирусами типа А и В. Вирус быстро элюирует с эритроцитов при комнатной температуре, поэтому реакцию гемагглютинации ставят при температуре 4—6° С.

Вирус размножается в куриных эмбрионах при заражении в амнион. Эмбрионы инкубируют при температуре 33° С в течение 2—3 дней. Из клеточных культур наиболее чувствительны клетки легких куриных эмбрионов и почек обезьян.

Антигенная структура вируса не подвержена таким изменениям, как у вирусов типа А.

Вирус циркулирует в человеческой популяции, однако он был также выделен и от свиней. Он не вызывает пандемий и эпидемий и является причиной спорадических заболеваний, чаще у детей, чем у взрослых. Заболевания, вызванные вирусом гриппа типа С, часто совпадают с эпидемией гриппа типа А. Клиническая картина такая же, как при легких и умеренно тяжелых формах гриппа А. Диагностика основана на выявлении антигена в отделяемом носоглотки в ИФ, выделении вируса в куриных эмбрионах, определении прироста антител в РТГА. Вакцинация не применяется.

<< | >>
Источник: А.Г. Букринская. Вирусология.— М.: Медицина, 1986—336 с.. 1986

Еще по теме ГЛАВА 11. СЕМЕЙСТВО ОРТОМИКСОВИРУСОЭ( ORTHOMYXOVIRIDAE ):

  1. РЕПТИЛИИ
  2. Социально-правовой строй
  3. Целеустремленность
  4. Глава I. СЕМЕЙСТВО ВИРУСОВ ОСПЫ(POXVIRIDAE)
  5. Глава 2. СЕМЕЙСТВО ВИРУСОВ ГЕРПЕСА (HERPESVHUDAE)
  6. Глава 3. СЕМЕЙСТВО ГЕПАДНАВИРУСОВ ( HEPADNAVIRIDAE )
  7. Глава 4. СЕМЕЙСТВО АДЕНОВИРУСОВ( ADEN О VIRID АЕ )
  8. Глава 5. СЕМЕЙСТВО ПАПОВАВИРУСОВ( Р APOVAVIRIDAE )
  9. Глава 6. СЕМЕЙСТВО ПАРВОВИРУСОВ(PARVOVIRIDAE)
  10. Глава 7. СЕМЕЙСТВО РЕОВИРУСОВ(REOVIRIDAE)
  11. Глава 8. СЕМЕЙСТВО ТОГАВИРУСОВ(TOGAVIRIDAE)
  12. Глава 9. СЕМЕЙСТВО КОРОНАВИРУСОВ(CORONAVIRIDAE)